Tinción de Gram
Fundamento: Basa su distinción en la estructura diferente de la pared bacteriana de las bacteria Gram + (pared más gruesa, y una sola capa de peptidoglucano) y de las Gram- (pared más delgada y dividida en dos partes).
Características: La tinción de Gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaños, morfologías celulares y reacción Gram (color). 
USOs:
La tinción de Gram es usada para clasificar bacterias sobre la base de sus formas, tamaños, morfologías celulares y reacción Gram (color). A nivel del laboratorio es útil como test para un rápido diagnóstico presuntivo de agentes infecciosos, tanto en muestras como en cultivos en crecimiento, y adicionalmente sirve para valorar la calidad de la muestra clínica.
Aplicaciones:La técnica de tinción de Gram puede ser aplicada a diversos especímenes clínicos como líquidos corporales estériles (LCR), Exudados, excreciones (orina), secreciones (esputo), abscesos y tejidos.
Material:1.- Cristal violeta o violeta de genciana (Colorante básico)
2.- Lugol de Gram (mordiente)
3.- Alcohol-acetona (decolorante)
4.- Fuscina-safranina (colorante de contraste)
Técnica:1.- Marcar y realizar un extendido delgado de la muestra clínica o de una colonia sobre un portaobjetos (placa) y dejar secar.
2.- Fijar el material a estudio a la placa pasándola 2 o 3 veces por la llama de un mechero evitando el excesivo calentamiento.
3.- Colocar la placa sobre un soporte y cubrirla con cristal violeta durante un minuto.
4.- Lavar con agua corriente.
5.- Cubrir la placa con lugol de Gram durante 1 minuto
6.- Lavar con agua corriente.
7.- Cubrir la placa con alcohol-acetona durante 5 segundos.
8.- Lavar con agua corriente.
9.- Cubrir la placa con fuscina-safranina durante 1 minuto.
10.- Lavar con agua corriente.
11.-Dejar secar al aire.
12.- Observar al microscopio.
Técnica de tinción de Ziehl-neelsen
Mycobacterium tuberculosis visualizacion usando tinción de Ziehl-neelsen.
Fundamento:
Este método se basa en que las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácido graso-ácidos grasos (por ejemplo, el ácido micólico) de cadena larga (50 a 90 átomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistencia bacilos, ácido-alcohol resistentes o BAAR (Tinción de Ziehl-Neelsen).
Características:
Es específica para una serie de bacterias con estructura de pared particular las micobacterias. La pared de las micobacterias está basada en ácidos micólicos.
Usos:
Este procedimiento se utiliza para aquellas bacterias que son difíciles de teñir con colorantes básicos porque se muestran impermeables para la coloración
Aplicaciones:
La tinción de Ziehl - Neelsen (AFB) es utiliza para la identificación de microorganismos patógenos por ejemplo M. tuberculosis y M. marinum.
Material:
1 - Fuente de calor (mechero de bunsen)
2 - Fucsina fenicada
3 - Ácido alcohol
4 - Azul de Metileno
Técnica:
1.- Hacer un frotis.
2.- Secar al aire y fijar por calor.
3.- Cubrir todo el portaobjetos con fucsina fenicada
4.- Calentar suavemente con el mechero hasta la emisión de vapores.
5.- El colorante no debe secarse ni hervir, añadir mas si es necesario.
6.- Mantener la emisión de vapores durante 5 minutos.
7.- Lavar con un chorro suave de agua
8.- Decolorar con alcohol acido
9.- Lavar con agua
10.- Cubrir el frotis con azul de metileno y dejarlo actuar durante un minuto.
11.- Lavar con agua, escurrir y dejar secar al aire.
12.- Observar al microscopio.
Hematoxilina-erosina
Corte del avestruz tráquea histológico. Tinción hematoxilina-eosina.
Fundamento: Esta técnica utiliza como fundamento la afinidad de las moléculas ácidas y básicas para atraer a su opuesto. Así, una molécula ácida tendrá afinidad por una molécula básica, y viceversa. Una simple reacción química. En esta técnica el colorante básico es la hematoxilina, mientras que el ácido es la eosina.
Características:
El método supone la aplicación de la tinción de hematoxilina, tiñe estructuras ácidas (basófilas) en tonos Azul y Púrpura, como por ejemplo los núcleos celulares; y el uso de eosina que tiñe componentes básicos (acidófilos) en tonos de color rosa, gracias a su naturaleza aniónica o ácida, como el citoplasma.
Aplicaciones: Tinción hematoxilina y eosina es uno de los métodos más populares de tinción utilizado en histología y medicina diagnostica. Su propósito es establecer los límites del tejido los componentes de la célula y para el anatomopatólogo pueda identificar y reconocer procesos patológicos, y bien sean congénitos, inflamatorios degenerativos o neoplásicos.
Material:
* Xilol
* Parafina
* Serie de alcoholes (100 °, 95 ° y 70 °)
* Hematoxilina
* Erosina
Técnica:
Este método se utiliza luego de:
I.- La fijacion de la muestra.
II.- La deshidratación – lavado de alcohol
III.- El aclaramiento con xilol
IV.- La inclusión en parafina.
V.- El corte.
Para después:
1.-Sumergir los preparados histológicos en xilol para eliminar los excesos de parafina.
2.-Luego pasan por una serie de alcoholes (100°. 95° y 70°).
3.-Se lava en agua para eliminar exceso de alcohol
4.-Se sumerge en hematoxilina por 10 minutos, luego se lava en agua para eliminar excesos y se pasa rápidamente por alcohol ácido.
5.-Se lava nuevamente
6.-Se sumerge 30 segundos en eosina.
7.-Se pasa por otra serie de alcoholes, en orden creciente (70°, 95° y 100°).
8.-Finalmente se deja remojar 10 minutos en xilol, antes de realizar el montaje final.
